高效液相色譜日常維護規程
　　HPLC用水來源
　　1專門的純水機或超純水機；
　　2去離子水重蒸；
　　3二次或三次重蒸水；
　　4采用類似家用的純水機；
　　5市場上瓶裝的純凈水或蒸餾水；
　　6其它途徑以上的水除第1項的水能用于梯度淋洗外，其余的水均難用于梯度淋洗。不管采用何種途徑，配制流動相應用新鮮水，水質越高放置時間越短。
　　理想的HPLC用水應為18.2MΩ的超純水，并通過0.22um的濾膜，除去熱源、有機物、無機離子及空氣等。最小檢測限的計算方法(以N2000色譜工作站為例)CL=2*Nd*c*20/HV注：Nd基線噪聲，單位：mVc樣品濃度H峰高，單位：mV(或AU)V進樣體積例：如基線噪聲為20微伏即0.02mV，萘的甲醇標樣溶液濃度為0.0001g/L，峰高145000微伏即145mV，進樣體積為20微升，即得：CL=2*0.02*0.0001*20/145*20=2.76e-8即10的負8次方
　　對儀器進行維護時應該遵循的幾條基本規則1.一次規則當系統出了故障，你可以試探性地改變某些狀態，一次可以改變一個參數。例如，限制色譜峰脫維的問題，可以依次改變流動相，換保護柱，換分析柱等。做一些簡單的改變步驟，也許就能解決問題。
　　2.二次比較規則在動手檢修之前已經明確了故障所在，或者已經確定了解決故障的方案。換句話說，動手之前已經找對了解決辦法。例如，在進樣過程中發現內標物的峰值變低了，可以重復進樣看看重復性如何，如果是偶然變低，是否是定量管里進了氣泡。這個規則可用于考察系統改變后的情況。更換了流動向后在正式進樣前可以進兩次標準品以檢查保留時間的穩定情況和色譜峰的穩定性。在梯度洗脫中如果出現了多余的峰，可以空載梯度洗脫一次(真的有問題嗎？)，用此規則可以避免不必要的改變，盡快確定糾正措施。
　　3.取代規則用好的部件換下可疑的部件，是查找故障的最好方法。如果你懷疑檢測器引起了噪音，就換一個性能好的檢測器。如果故障被排除了，就說明換下的檢測器有問題。這個規則應用的規模有大有小，可以從換整個部件到換印刷線路板上的集成塊。
　　4.換回規則這個規則和取代規則一起運用，好部件取代了可疑部件后情況并未得到改善，應重新換上原部件。這樣做的維修費用最小，也防止了用過的部件積壓下來。這條規則僅適用于單一的故障。換回原則不適用于以下的情況：(1)在取下時新部件已損壞(如泵密封墊圈)；(2)部件價格低(如柱內襯過濾片)；(3)重新裝上原部件要冒損壞的風險；(4)定期更換的部件。
　　5.參考條件規則通常有兩種參考條件：①標準參考條件；②試驗參考條件。
　　標準參考條件也叫標準試驗條件，是從一個系統到另一個系統，從一個實驗室到另一個實驗室都易于驗證的條件。用該條件所測得的數據有助于識別實際試驗和系統間的問題。如果在某試驗條件下系統壓力升高，而在標準條件下壓力正常。這說明系統異常是由實驗室的變化所引起的。下表列舉了啟用新色譜柱是的標準試驗條件，在使用過程中也可用此標準試驗條件檢查系統的情況。流動相甲醇/水(體積比=70/30)色譜柱C18反相流速1mL/min檢測器UV254nm樣品尿嘧啶(用于t0)苯酚，苯乙酮，硝基苯，苯甲醚，甲苯流動相正己烷/異丙醇(體積比=75/25)色譜柱腈基極性鍵合相流速1mL/min檢測器UV254nm樣品硝基苯，芐醇，2,4-二硝基甲苯，對硝基芐醇流動相正己烷/二氯甲烷/異丙醇胺(體積比=95/4/1)色譜柱硅膠正相流速1mL/min檢測器UV254nm樣品2-苯-2-丙醇，甲芐醇，肉桂醇試驗參考條件是用于檢查正常系統每天的工作情況。要選最方便的方法驗證這種條件。每天可以打印兩張校正用色譜圖作對照，檢查保留時間、峰寬、系統壓力等方面的變化。發現峰的斜率、色譜柱塔板數和其他參數與原來色譜圖相比有了變化，說明系統在運行中可能發生了問題。當然發生問題不結合實際分析程序考慮，只通過查找標準參考色譜圖是不能一目了然的。
　　6.記錄規則這條規則往往被人忽視。應該在每次維護和故障排除后都作記錄。例如，對系統的某一特定故障因為沒作記錄就不可能系統地分析問題，費時又費力。從長遠掛點看，系統發生的特定故障對今后的操作也有極其重要的意義。每臺儀器都應備有維修記錄本，內容包括日期、故障部位、現象、產生的原因、解決的辦法和結果等。還有一點要注意，試過或換下的部件都要貼上標志。
　　做好維修保養記錄有如下好處：
　　(1)讓所有的操作人員都知道發生了什么故障，在操作過程中以引起注意；
　　(2)幫助操作人員描述故障現象；
　　(3)當再次發生故障時可根據資料盡快解決問題。
　　7.預測規則有維修實踐和保養習慣的人員應能夠預測系統的故障，平時在保養方面多投入些時間，系統會以減少故障作為報答，同時也消除了連鎖性的損壞。例如，平時不注意保養，泵的密封墊圈壞了，造成流動相滲漏，會腐蝕泵和其它部件。善于保養能節約時間和金錢，而不是儀器控制了操作人員。例如，每天開始工作或結束工作時發現燈壽命引起基線漂移就把燈換下來。如果等到燈全壞了，就需要停機，造成的損失可能比一個燈的費用還要高。
　　8.緩沖液規則這條規則提醒你停機時一定要洗凈系統中的緩沖物。系統中的緩沖物的殘余會造成磨損、腐蝕和阻塞。另外，生理緩沖液極易受到細菌和霉菌的影響。理想的沖洗液是不含緩沖物的相同組成的流動相。不要讓純水儲藏于系統中，以防生長細菌。可在水中加入10%的有機溶劑或0.02~0.05%的疊氮化鈉。在實驗室中應按如下程序沖洗：用純水沖洗30~60min(1mL/min)再用甲醇沖洗30min后關機。千萬不能一開機就用有機溶劑沖洗，否則無機鹽就`會沉淀在系統中，造成不良后果。