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  • 柱溫箱在HPLC分析中的作用

    發(fā)布于 2018/02/02閱讀(2500)來源 zxj標簽 HPLC

    摘要

    柱溫箱在HPLC分析中的作用

    內(nèi)容

      在操作HPLC時,色譜柱是在室溫環(huán)境下工作的。大多數(shù)的工作環(huán)境溫度是不斷變化的,溫度的差別就會引起較復雜的問題。溫度的影響在所有的色譜分析方式中都是存在的,HPLC方法中的洗脫方式受溫度的影響。

      等度洗脫時溫度會影響保留時間,當溫度升高時所有的色譜峰都前移了,等度洗脫時一般溫度每升高1℃,保留時間會縮短(1~3%。溫度變化對梯度洗脫和等度洗脫的影響趨勢是一樣的。溫度變化對梯度洗脫的影響要小于對等度洗脫的影響。即便如此,若梯度洗脫時不控制溫度的話,保留值一般也會有較大的變化。溫度變化還可能引起選擇性顯著變化。

      正如柱子不能完全平衡將導致保留時間的重現(xiàn)性差一樣,柱溫不平衡也會導致不理想的后果,這個問題在峰寬上的影響尤其明顯。當溫度變化時除了選擇性和保留時間的變化之外,峰寬也會發(fā)生變化。升高溫度通常會使理論塔板數(shù)升高,峰寬變窄,由于峰面積不變,峰越窄就會越高,因此升高溫度可以達到更小的檢測限。

      柱子里的溫度變化也會影響峰形。當流動相和柱子之間的溫差增大時,由溫度不平衡而導致的峰變形就會加劇。

      為了獲得一致的結(jié)果我們必須要控制柱溫,使用柱溫箱是最好的辦法。如果沒有柱溫箱,最有效的辦法就是將色譜柱隔絕在一個溫度波動最小的地方

     

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